摩思睿生物(MouseRat.cn)--专注动物实验资源分享!

当前位置: > News >

HEPES缓冲液的配制和使用方法

时间:2015-10-30 19:17来源:网络 作者:佚名 点击: 点击此处获得【转发赠送积分】网址
分享到: 更多

在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养

HEPES缓冲液的配制和使用方法

日期:2012-05-16     来源:互联网

标签:

相关专题:HEPES缓冲液的配制和实验方法

摘要 : 在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。 HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。 HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。

在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。

HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。

HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/rna提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。

关于HEPES 缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下:

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制

119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。

二、加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml)

HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。

三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制

将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5M NaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。

HEPES使用方法有两种:

(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L。

(2)亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L),使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液,最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES贮存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。

需要注意的是,HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L,对细胞无毒性作用。一般情况下,浓度为20mmol/L的HEPES即可达到缓冲能力。现在市售HEPES为约10g包装的小瓶,大家根据实际情况正确灵活配制就OK了。

作者:keeii 点击:次

(责任编辑:hai)
织梦二维码生成器
顶一下
(0)
0%
踩一下
(0)
0%
------分隔线----------------------------
发表评论
请自觉遵守互联网相关的政策法规,严禁发布色情、暴力、反动的言论。
评价:
表情:
用户名: 验证码:点击我更换图片
年世界杯彩票 世界杯足球竞猜app 2018世界杯彩票发售 足球竞猜 竞彩足球 俄罗斯vs沙特 足球世界杯赌球开庄 足球彩票投注app 足彩复式投注计算 体彩世界杯竞猜规则 世界杯赌球app哪个好 竞彩足球比分直播360彩票 世界杯 赌球模式 竞彩足球稳定盈利 世界杯赌球可靠吗 世界杯足彩娱乐 世界杯足彩 张路 竞彩足球比分360 足球竞猜4串4啥意思 股市抽资世界杯赌博 竞彩足球庄家如何盈利 世界杯2018哪里可以赌球 足球彩票网 足球计算器竞彩网 足球外围大小球 足球外围靠谱吗 2018年世界杯体育彩票 体彩世界杯足球竞猜 外围足球网址 外围足球网址 足球彩票哪里买靠谱 世界杯赌外围什么意思 俄罗斯世界杯彩票预测 世界杯皇冠线上赌球网址 足球外围投注app 世界杯买彩票软件 竞猜足球胜平负开奖结果 2018世界杯彩票往上在哪买 世界杯2018彩票网上怎么买 世界杯怎么买球