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国家实验细胞资源共享平台成功建立小鼠iPSCs模型

时间:2015-10-28 16:52来源:网络整理 作者:cell 点击: 点击此处获得【转发赠送积分】网址
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国家实验细胞资源共享平台的依托单位中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院细胞资源中心,利用C57BL/6J小鼠12.5d的胚胎成纤维细胞,感染含有Sox2、Oct4、Klf4和c-Myc的慢病毒进行重编程。病毒感染后12d挑取iPSCs的克隆进行扩大培养,进行碱性

    国家实验细胞资源共享平台的依托单位中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院细胞资源中心,利用C57BL/6J小鼠12.5d的胚胎成纤维细胞,感染含有Sox2、Oct4、Klf4和c-Myc的慢病毒进行重编程。病毒感染后12d挑取iPSCs的克隆进行扩大培养,进行碱性磷酸酶染色鉴定。体外悬滴培养检测拟胚体(EB)的形成,并皮下接种BABL/c裸鼠检测畸胎瘤形成。全反式维甲酸诱导iPSCs克隆定向分化。PCR法进行种属鉴定并检测支原体。已得到了12个碱性磷酸酶阳性的小鼠iPSCs克隆,体外可以形成拟胚体,其中9个克隆可以在BALB/c裸鼠体内形成畸胎瘤。全反式维甲酸可诱导iPSCs定向分化为平滑肌细胞。成功建立了小鼠iPSCs模型。经鉴定这些iPSCs克隆种属鉴定为鼠源性,无支原体的污染,已细胞资源中心入库保藏。
    这些细胞的建立为干细胞研究、iPSCs重编程机制及定向分化研究提供可利用的资源。
    国家实验细胞资源共享平台依托于中国医学院基础医学研究所,提供细胞服务、细胞DNA样本、支原体检测、种属鉴定和STR检测等服务。提供各类动物组织材料、染色体分析等。主要服务对象是从事生命科学和医学的基础研究、生物技术产业化和医疗卫生事业的广大的科研人员。 

(责任编辑:hai)
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